中文字幕无码家庭乱欲,欧洲亚洲国产精华液,草莓污视频,两个人看的www高清视频,精品久久久中文字幕人妻,亚洲欧美综合区自拍另类,一区二区三国产精华液,国产亚洲一区二区在线观看
歡迎光臨上海懋康生物科技有限公司
主頁 > 技術文章 > X-Gal平板制備的過程是怎樣的
技術文章
X-Gal平板制備的過程是怎樣的
   X-Gal也稱5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactopyranoside或5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside,X-Gal是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)的顯色底物,在β-半乳糖苷酶的催化下會產生藍色產物。X-Gal在β-半乳糖苷酶的催化下水解后呈藍色,因此常用于轉基因篩選試驗中,如藍白斑篩選或β-半乳糖苷酶的原位染色檢測實驗。藍白斑試驗中主要根據菌落呈現的顏色即可簡單的挑選出哪些是轉化子。

  X-Gal的使用方法

  首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液(-20℃避光保存),然后在100 ml的瓊脂培養基中,加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG(24 mg/ml)和100 μl的Amp(100 mg/ml),制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培養基。當DNA片段插入至pUC系列載體(或其他帶有lacZ、Amp基因載體),然后轉化至lacZ缺失細胞中后,涂布上述的X–Gal、IPTG、Amp平板培養基,可根據長出菌體的藍白色,而方便地挑選出基因重組 體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。

  IPTG-X-gal 平板制備的過程

  一、IPTG儲液配置:一般將IPTG配成20%(m/V)(約0.84M)的母液。稱取0.5克 IPTG粉末,用2 ml蒸餾水將其*溶解后,補加蒸餾水至2.5ml,用孔徑0.22 μm的小型注射型過濾器 (預先裝好濾膜滅菌備用)過濾除菌,-20 ℃凍存。

  二、X-gal儲液配置:用二甲基甲酰胺溶解X-gal配制成的20mg/ml的貯存液。稱取0.2克X-gal,加入10ml二甲基甲酰胺(DMF),溶解后保存于一小血清瓶內,裝有X-gal溶液的血清瓶須用鋁箔封裹以防因受光照而被破壞,并應貯存于-20℃。X-gal溶液無須過濾除菌。

  三、IPTG-X-gal平板制備:在含氨芐或卡那抗生素平板上,滴加40 µL的X-gal儲液及5 µL的IPTG儲液(怕體積過小影響涂布均勻,可適當稀釋后再涂布),涂布均勻后晾干后使用。在臨使用前提前1h制備。

  為方便實驗操作,試驗中也可以將X-gal和IPTG的儲備液按照菌液體積和平板數量計算好濃度,直接加入到準備用于涂平板的細菌培養液中,混勻后即可涂平板,這樣可以節省試驗時間。若經過培養后長出的菌落藍白斑顯示的不夠明顯,可以將平板放入4度冰箱里,過一段時間以后菌落的藍白斑就顯示的比較清晰了。

  X-Gal的注意事項:

  培養噬菌體時,Top agar中的添加量為:50 μl/3 ml(20mg/ml)。含有X-Gal的培養基4℃避光保存,須在1~2周內使用。

  • © 2019 上海懋康生物科技有限公司 版權所有 技術支持:環保在線
  • 電 話:18616957973 傳 真:86-021-54736159 QQ號碼:1563822900 郵 箱:2971634497@qq.com 地 址:上海市閔行區虹梅南路2588號綠亮科創園1幢A棟321室
  • 備案號:滬ICP備16016464號-3 總訪問量:597379
在線客服 聯系方式

服務熱線

18616957973

主站蜘蛛池模板: aⅴ久久欧美丝袜综合| 久久久久人妻精品一区三寸| 欧美影院| 久久精品人人做人人爽老司机| 3d动漫精品啪啪一区二区下载| 成人国产精品一区二区网站公司| 成人欧美日韩一区二区三区| 两个人的免费视频完整版| 一面上边一面膜下边的免费| 真实单亲乱l仑对白视频| 美女mm131爽爽爽作爱视频| 免费a级毛片出奶水| 熟女人妻视频| 肉多荤文高h羞耻玩弄校园| 99久热re在线精品99 6热视频| 永久黄网站色视频免费| 中文字幕 日韩精品 在线 | 国产美女久久精品香蕉| 人妻2| 国产精品视频啊啊| 国产成人亚洲综合色就色| 好男人在线观看免费高清| 亚洲 中文字幕 日韩 无码| 日产幕无线码三区在线| 久久无码人妻一区二区三区午夜 | 妇女bbbb插插插视频| 加勒比hezyo黑人专区| 性高朝久久久久久久久久| 蜜桃视频app下载网站| 狠狠躁日日躁夜夜躁2022麻豆 | 在线视频网站www色| 女人18毛片a级毛片免费视频| 无码成人一区二区三区| 久久午夜无码鲁丝片直播午夜精品| 国产欧美日韩专区发布| 亚洲一卡2卡三卡4卡高清| 成全我在线观看免费第二季| 国产精品18久久久久久不卡| 女人高潮被爽到呻吟在线观看| 欧美老熟妇欲乱高清视频| 韩国电影办公室免费|